Бактериостатическая активность

При неэффективной терапии и отрицательной туберкулостатической пробе (с культурой больного) можно подобрать для данного больного наиболее удачные комбинации и дозировки туберкулостатических препаратов, повторяя постановку туберкулостатической пробы до получения положительных результатов. В организме различных больных создаются неодинаковые концентрации антибактериальных препаратов, могущие в ряде случаев оказывать бактериостатическое действие и на Лекарственно-устойчивые микобактерий туберкулеза или не оказывать его на лекарственно-чувствительные. Вследствие этого результаты определения лекарственной устойчивости не всегда идентичны для клиники. Особенно целесообразно сопоставлять результаты туберкулостатической пробы и лекарственной устойчивости к препаратам ГИНК, которые в различной степени инактивируются в организме больного (Н. М. Рудой, 1964; Г. А. Смирнов, 1964). В литературе сообщается (М. А. Клебанов и Н. Ф. Бибик, 1966; Kreis, 1957; Lucchesi et al., 1968) о возможности эффективной терапии при наличии первичной лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза. Последнее можно объяснить тем, что создаваемые концентрации препаратов в крови часто превышают лабораторные показатели устойчивости (Т. И. Козулицина и Ю. П. Афанасьева, 1972). Одним из факторов, объясняющих отсутствие терапевтического эффекта при лекарственной чувствительности микобактерии туберкулеза и, наоборот, положительные результаты лечения при лекарственной устойчивости, являются отрицательные или положительные результаты туберкулостатической пробы (Б. И. Кочетов и И. Е. Гурьян, 1971).

Фотохромогенные микобактерии

Количественное определение каталазы служит известным критерием для определения происхождения атипичных штаммов, приближая их в одних случаях к микобактериям туберкулеза, в других — к кислотоупорным сапрофитам. Каталаза атипичных микобактерии термостабильна. Термостабильность каталазы определяется по методу, предложенному Sato и Satace, модифицированному Н. М. Макаревич (1968). В одной пробирке готовят 3 мл густой суспензии микобактерии. Половину этой суспензии переносят в другую пробирку и прогревают на водяной бане 10 минут при 68°. Затем пробирки охлаждают и на предметное стекло (раздельно) наносят по капле гретой и негретой суспензии. К каждой из них добавляют по 1 капле пергидроля. По образованию пузырьков судят о термостабильности (атипичные, кислотоупорные сапрофиты) или термолабильности каталазы (микобактерии туберкулеза). Перечисленные тесты, применяемые для первичной дифференциации атипичных микобактерии, могут быть выполнены в любых лабораториях, производящих бактериологические исследования. Если с помощью комплекса указанных тестов не удается провести дифференциацию, то требуются более глубокие исследования, проводимые в крупных, хорошо оснащенных лабораториях, при этом также выполняется комплекс исследований. Ниациновый тест. Атипичные микобактерии — ниацин-отрицательны. Реакция восстановления нитратов по Kubica. Микобактерии туберкулеза человеческого типа редуцируют нитраты в отличие от бычьего и птичьего типа и атипичных. Среди последних исключение составляют М. и некоторые микобактерии III группы. Изучаемую культуру выращивают (3-4 недели) на яичной среде. В пробирку помещают снятую со среды культуру (2-3 петли), добавляют2-3 капли воды и 2 мл

Лабораторные исследования на грибы

Для лабораторного диагноза кандидамикоза необходимы повторные иследования, результаты которых должны увязываться с картиной заболевания. Результаты посевов и выделение культур кандид учитываются в соответствии с клиникой, так как у здоровых лиц в 30-50% бактериологические исследования окажутся положительными в результате кандиданосительства (моча, мокрота, кал), а не заболевания. Имеет значение сопоставление положительных результатов посева с микроскопическим исследованием: большое количество почкующихся клеток и выделение культуры может подтвердить диагноз кандидамикоза. Э. Л. Левина нашла у больных туберкулезом носительство дрожжеподобных грибов в 51,8%, носительство грибов кандида в 46,4% случаев. Посев материала производят на среду Сабуро или на среду Сабуро с агаром (к питательной среде рекомендуется добавлять пенициллин или стрептомицин 50- 60 ЕД/мл). Перед посевом, если материал содержит другую микрофлору, его целесообразно обработать 6-7% раствором серной кислоты. Посевы выдерживают 2-3 дня при 30 °С или при комнатной температуре. Грибы кандида дают блестящие, выпуклые сметанообразные колонии, причем этот характерный вид колоний выявляется на 5-6-й день после посева. При микроскопическом исследовании снятой колонии выявляются почкующиеся круглые или овальные клетки и нити мицелия. Различают несколько видов гриба кандида. Наиболее часто встречаются Candida albicans, второе место занимают Candida tropicalis. Э. Л. Левина (1967) описала простой метод их идентификации, пригодный для использования в практических лабораториях. В основу метода положено образование хламидоспор, присущее только грибам рода Candida. Делают пересев культуры на рисовый агар в чашках Петри. Засеянные чашки инкубируют при 37° в течение 2 суток и сутки выдерживают при комнатной температуре с ограничением аэрации (завернуты в бумагу и помещены в плотно закрытый шкаф). Колонии рассматривают с обратной стороны чашки под малым увеличением микроскопа. Колонии Candida albicans имеют паукообразный вид, колонии Candida tropicalis напоминают звездочки.

Сдвиги в гемограмме

Моноцитоз в клинике туберкулеза бывает связан с формированием новых бугорков в органах (Н. А. Шмелев и др., 1935). Стойкое, длительно держащееся повышение количества моноцитов (норма — 4-8%) имеет место при первичном туберкулезе, что зависит от характерного для него гематогенного рассеивания возбудителя по органам, а также (в меньшей степени) при гематогенно-диссеминированной форме вторичного периода. При тяжелом течении первичного туберкулеза и, реже, при вторичных формах наблюдается монопения (2-3%), свидетельствующая об угнетении ретикуло-гистиоцитарной системы. Последующее улучшение состояния больного может сопровождаться наряду с нормализацией показателей гемограммы моноцитозом, который должен расцениваться как благоприятный признак, отражающий восстановление функции ретикуло-гистиоцитарной системы. Повышение количества моноцитов в крови больного туберкулезом не должно, однако, трактоваться во всех случаях без сопоставления с клиническими данными как показатель гематогенной диссеминации процесса. Оно может зависеть от интеркуррентных инфекций и иных факторов, вызывающих раздражение ретикулогистиоцитарной системы, которая находится при туберкулезе в состоянии повышенной возбудимости. Отражаемые лейкоцитарной формулой процентные соотношения отдельных групп клеток находятся в соответствии с их абсолютными величинами лишь при нормальном общем количестве лейкоцитов. При значительном увеличении или уменьшении общего числа лейкоцитов крови следует уточнять, за счет какой группы клеток это происходит, т. е. учитывать не только относительные, но и абсолютные числа. Проводимый по специальной методике подсчет абсолютного числа базофилов, встречающихся в формуле крови в виде редких клеток, позволяет выявлять увеличение их количества при активном туберкулезном процессе (Н. А. Шмелев, А. И. Ковязина, 1971).

Специфическая сенсибилизация лейкоцитов

Способность к фагоцитозу является одной из основных функций лейкоцитов крови, которая находится в зависимости как от функциональной активности самих клеток, так и от факторов внутренней среды организма. Фагоцитарная активность наиболее выражена у нейтрофилов; в меньшей степени она присуща моноцитам. При исследовании фагоцитарной активности клеток крови в клинике туберкулеза в качестве объекта фагоцитоза используются как микобактерии туберкулеза (штамм БЦЖ, вирулентные штаммы), так и стафилококк. Г. Е. Платонов (1931) предложил для определения фагоцитарной активности микрометод, при котором используется небольшое количество крови без антикоагулянта. Количество микробных тел во взвеси культуры БЦЖ определяется не по бактериальному стандарту, а рассчитывается в смеси с кровью по соотношению с числом эритроцитов. Данный метод является весьма трудоемким и поэтому в практике чаще используются менее сложные методики. При использовании в качестве объекта фагоцитоза микобактерии туберкулеза берут 1-2-месячную культуру. При окраске по Цилю-Нильсену следует применять для обесцвечивания не 5%, а 2% раствор серной кислоты, так как первый препятствует надлежащей окраске микобактерии (В. М. Солдатова, 1958). Докраска мазков может производиться краской Романовского-Гимзы или 0,05% раствором метиленового синего (10 минут). При постановке фагоцитоза необходимо соблюдать в опытах равные условия. Концентрация бактериальной взвеси должна быть постоянной. Повышение ее меняет течение фагоцитоза и увеличивает неспецифические явления адсорбции микробов поверхностью лейкоцитов. Оптимальными являются величины в 0,5-1 млрд, микробных тел в 1 мл (Н. И. Латышева, 1955). Интенсивность фагоцитоза находится в связи с типом культуры и временем ее хранения. Восьмимесячные культуры микобактерии туберкулеза фагоцитируются более активно, чем двухмесячные (В. М. Солдатова).